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唾液樣本可以以方便、微創(chuàng)、可重復(fù)的方式采集。唾液是一種復(fù)雜的異質(zhì)生物樣本，如果收集不當(dāng)可能會導(dǎo)致數(shù)據(jù)錯(cuò)誤。然而，通過遵循正確的唾液采集和處理程序，可以從這種樣本類型中獲得高質(zhì)量、可重復(fù)的數(shù)據(jù)。 收集唾液之前要考慮什么？
唾液中許多分析物的水平不會保持靜態(tài)，濃度可能會因多種影響而發(fā)生變化 (1-5)。個(gè)體之間的樣本也可能存在很大差異。根據(jù)感興趣的分析物和研究的性質(zhì)，有幾個(gè)因素可能很重要：
收集時(shí)間——大多數(shù)激素表現(xiàn)出晝夜節(jié)律的表達(dá)，對于某些唾液蛋白來說也是如此?；谄べ|(zhì)醇的研究尤其受到晝夜周期中皮質(zhì)醇表達(dá)節(jié)律的影響，并且針對皮質(zhì)醇晝夜表達(dá)的特定研究是研究設(shè)計(jì)的核心。我們建議查看文獻(xiàn)中的最新建議或根據(jù)待測試的分析物向?qū)＜易稍兙唧w建議。對于大多數(shù)研究來說，樣本收集應(yīng)該在特定時(shí)間或在一個(gè)時(shí)間窗口內(nèi)進(jìn)行，以獲得最有意義的測量。
反應(yīng)和恢復(fù)特征——如果研究涉及干預(yù)措施和壓力源，則應(yīng)定時(shí)收集樣本以正確捕獲反應(yīng)。對于持續(xù)數(shù)月的較長間隔研究或測量壓力反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室壓力源研究來說，情況確實(shí)如此。
吸收裝置可能會收集局部唾液而不是整個(gè)唾液，這可能會影響某些分析物的結(jié)果。 α-淀粉酶和分泌型 IgA 等蛋白質(zhì)的唾液水平確實(shí)根據(jù)口腔位置的不同而有所不同 (6-8)。我們建議將吸收裝置放置在唾液聚集的位置。對于直立坐著的成人或兒童來說，口腔底部（舌頭下方）是理想的位置。對于處于傾斜位置的嬰兒、成人和兒童，我們建議將頭轉(zhuǎn)向一側(cè)，并從“積聚"唾液的臉頰一側(cè)收集唾液。當(dāng)通過被動口水收集唾液時(shí)，我們建議讓唾液積聚在舌下，并通過吸管狀收集輔助裝置輕輕地將收集到的口水推入管中。該樣本還將代表從所有唾液腺收集的唾液，并消除從特定唾液腺收集唾液的任何偏差。
一些親水性分析物（例如 DHEA-S 和/或較大蛋白質(zhì)（例如 SIgA））的水平隨著唾液流速的增加而降低，并且唾液 α-淀粉酶也可能受到類似影響 (9, 10)。目前，我們建議研究人員共同改變 α-淀粉酶、SIgA 和 DHEA-S 等分析物的分泌速率 (mL/min)。
記錄收集所需唾液量所需的總時(shí)間，以便測定結(jié)果可以乘以流速（mL/分鐘），以便將結(jié)果表示為分泌率（每單位時(shí)間的輸出）。
示例 (SIgA)：205.60 µg/mL x 1.33 mL/min = 273.45 µg/min
要確定使用吸收裝置收集唾液時(shí)的流速，請?jiān)谑占昂髮κ米雍蛢Υ婀芤黄鸱Q重。 （唾液密度可假定為 1.0 g/mL 的近似值。）同時(shí)記錄拭子在口腔中的時(shí)間長度，以便可以估計(jì)流速。
現(xiàn)代免疫測定設(shè)計(jì)為使用小樣本量（小于 100 µL），并且在大多數(shù)情況下，不需要刺激劑來收集足夠的樣本量。我們建議在收集唾液樣本時(shí)不要使用口腔刺激劑，因?yàn)榭赡軙?dǎo)致測定干擾或某些分析物水平的改變 (11)；目標(biāo)應(yīng)該是盡量減少唾液測試結(jié)果中不必要的變異來源。例如，即使咀嚼無味的石蠟/蠟也可能影響流量依賴性分析物。
如果刺激劑是絕對必要的（不使用刺激劑就無法收集唾液）；
在整個(gè)研究過程中以一致的方式謹(jǐn)慎使用 (12)。
在使用口服刺激劑之前，考慮使用嗅覺或視覺刺激。
在實(shí)際收集之前嘗試與研究參與者一起練習(xí)，以確保在實(shí)際研究收集之前熟悉該方法。
進(jìn)行試點(diǎn)研究以確?？诜碳┎粫斐蓽y定或分析物干擾 (11)。
在樣品采集之前，請查看分析物采集方案或根據(jù)要執(zhí)行的檢測的數(shù)量和類型
如果您計(jì)劃在當(dāng)前的研究中包括 DNA 分析，正在存檔以供將來某個(gè)日期進(jìn)行 DNA 分析，或者希望對之前存檔的現(xiàn)有樣本進(jìn)行 DNA 分析
許多分析物在體循環(huán)中的水平高于唾液中的水平，并且在特定條件下血液污染可能是一個(gè)問題 (21-24)。我們建議如下：
我們建議如下：
參與者在樣本采集前 45 分鐘內(nèi)不應(yīng)刷牙 (23)。
樣本采集前 24 小時(shí)內(nèi)不應(yīng)進(jìn)行牙科工作。
研究參與者應(yīng)該接受口腔健康問題或損傷的篩查。
明顯被血液污染的唾液樣本應(yīng)丟棄并重新收集（22）。
從口腔健康問題高風(fēng)險(xiǎn)人群采集的樣本可以使用 Salimetrics 血液污染檢測試劑盒（Salimetrics 項(xiàng)目 1-1302；1-1302-5）進(jìn)行篩查。
所使用的收集協(xié)議與待測試的分析物兼容至關(guān)重要。有些分析物只能用被動滴液收集的樣品進(jìn)行測試。使用拭子測量這些分析物可能會導(dǎo)致所測量的分析物回收率過高或過低。
并非所有拭子都是一樣的。我們建議使用經(jīng)過驗(yàn)證可用于測量目標(biāo)分析物的拭子。一些制造商擁有專門針對皮質(zhì)醇的拭子，并且僅針對皮質(zhì)醇的測量進(jìn)行了驗(yàn)證。使用此拭子測量另一種激素（例如睪酮）可能會導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。使用棉花作為拭子材料已在文獻(xiàn)中被證明是可變結(jié)果的來源，如果需要一致的結(jié)果且不被生物材料混淆，則不推薦使用棉花。 Salimetrics 已證實(shí)，來自棉花采集設(shè)備的數(shù)據(jù)通常與 Shirtcliff、EA 等人的論文（2001 年）被廣泛引用的相匹配。然而，基于棉花的方法也會增加變異性，并提供與“真正的被動流口水"值顯著不同的數(shù)據(jù)結(jié)果，如下圖所示；
通過 SalivaBio 口腔拭子測量收集的唾液樣本與通過被動流口水獲得的樣本非常接近。 N=10
在樣品采集之前研究并遵循基本分析物穩(wěn)定性和儲存建議至關(guān)重要。僅使用高質(zhì)量聚丙烯收集管和小瓶來儲存樣品。聚苯乙烯或其他未經(jīng)驗(yàn)證的塑料管可能會對分析物的測量值產(chǎn)生不利影響。所有SalivaBio 收集管和小瓶均由優(yōu)質(zhì)聚丙烯制成。
Salimetrics 建議所有樣品在采集后立即冷凍。然而，如果這是不可能的，研究人員應(yīng)該考慮：
一些不穩(wěn)定的分析物在室溫下會快速變化（即肽和蛋白質(zhì)）
對于某些分析物，例如（脫氫表雄酮、黃體酮、雌二醇），應(yīng)盡量減少凍融循環(huán)
Salimetrics是一家全球著名的唾液生物學(xué)研究領(lǐng)域?qū)I(yè)產(chǎn)品供應(yīng)商，其在唾液的收集方法、生物學(xué)性質(zhì)及其（唾液中各生物組分的含量）定量檢測技術(shù)擁有絕對的研發(fā)與產(chǎn)品供應(yīng)優(yōu)勢。作為唾液生物學(xué)研究及診斷試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，其供應(yīng)的唾液手機(jī)方案及唾液成分的ELISA檢測試劑盒均專門唾液的理化性質(zhì)所設(shè)計(jì)，可確?？蛻粼诳茖W(xué)研究或臨床診斷中得到穩(wěn)定、準(zhǔn)確的唾液生物學(xué)信息，并同時(shí)具有操作簡便、結(jié)果精確可靠、可重復(fù)性高、耗時(shí)少等諸多優(yōu)點(diǎn)。Salimetrics的唾液檢測實(shí)驗(yàn)室及擁有豐富的唾液生物學(xué)研發(fā)經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)團(tuán)隊(duì)可以為廣大客戶提供唾液生物學(xué)研究及診斷應(yīng)用的專業(yè)指導(dǎo)。
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